PerfectHyb^® Hybridization Solution

 
サザン・ノーザンブロット解析用の高効率プレミックスハイブリダイゼーション用溶液です！
本製品は、ハイブリダイゼーション促進剤を含有した、ノーザン、サザン対応用プレミックスタイプのハイブリダイゼーション溶液です。従来法に比べ、迅速で簡便な解析が可能です。本製品は一切の添加物が不要であり、常温での結晶の析出がなく粘性も低いため、ハンドリングが容易です。また、ハイブリダイゼーションと洗浄の温度を同一に設定でき、ハイブリダイゼーションオーブンを用いた解析に最適です。また、RIラベルプローブの解析だけではなく、DIGラベル等のNon-RIの解析にも使用できます。


特長1：高感度
ハイブリダイゼーション促進剤を含有しており強いシグナルが得られるため、
低発現遺伝子の検出に有効です。

特長2：幅広い用途に最適化
サザン及びノーザンブロット解析に使用できます。Non-RI解析用としても至適化されています。

特長3：迅速
通常のハイブリダイゼーションは1∼2時間で完了します。

特長4：簡便
常温での結晶の析出がなく、粘性も低いため、ハンドリングが容易です。
Salmon sperm DNAなどの添加も不要です。
また、ハイブリダイゼーションと洗浄の温度を同一に設定でき、
ハイブリダイゼーションオーブンを用いた解析に最適です。

実施例1.PerfectHyb^® を用いたノーザンブロット例
HeLa細胞のTotal RNA 5μgを使用して、Northern Blotを行いました。
MagExtractor^TM -RNA-を使用してTotal RNAの抽出を行い、
50%ホルムアミドを含むアクリルアミドゲルにて電気泳動を行い、
メンブレンに転写を行いました。
プローブはTransferrin Receptor遺伝子を鋳型に、ランダムプライミング法を
用いて、[³²P]dCTPによるインターナルラベルのプローブを作製し、
MagExtractor^TM -PCR & Gel Clean up-より精製を行いました。
PerfectHyb^® および他社ハイブリダイゼーション溶液を使用した検出と
通常法(参考図書：Molecular Cloning 7.52)の検出を行いました。
その結果、他社品と比べ感度良く検出することができました。


実施例2.PerfectHyb^® を用いたサザンブロット例
ヒトゲノムDNAのVNTRの解析を行いました。
Human Cell Lineから抽出したゲノムDNAを
HaeIIIで切断したものを1μg泳動し、メンブレンに転写しました。
プローブは、多型解析プローブYNH24(D2S44)を
DIG標識したものを使用しました。
その結果、他社品と比べ感度および特異性が高いことが確認できました。

●mRNAブロットメンブレンへの使用
プレブロットメンブレンの解析には、バックグラウンド等を考慮してRIラベルのcDNAプローブあるいはオリゴプローブの使用をお薦めします。

●ハイブリダイゼーションの時間について
通常のハイブリダイゼーションは1〜2時間で完了します。発現量の低いmRNAの検出の場合、overnightでの反応により感度を向上させることができます。

品名をクリックすることで、取扱い説明書をダウンロードいただけます

＜関連製品＞
『RNA Size Maker』