


クローニング効率、反応時間を大幅に改善!
KODシリーズにも対応(TArget CloneTM -Plus-)
TAクローニングは特別なプライマーを用いる必要が無く、制限酵素等の処理も必要としないので、PCR産物のクローニング方法として広く普及しています。しかし、従来の
TAクローニング法では、ベクターのセルフライゲーションに起因する擬陽性が高頻度で見られました。本製品はこれらの問題を改善し、さらにライゲーション反応時間を大幅に短縮しました。また、
TArget CloneTM -Plus-は、弊社のHigh Fidelity PCR用酵素である
KOD及び
KOD -Plus-の平滑末端のPCR産物をそのまま
TAクローニングへ持ち込むことができます。
| TArget CloneTM |
一般的なTaq系のPCR酵素(rTaqやBlend Taq®など)やKOD Dash®で増幅したPCR産物の高効率TAクローニング 【3’末端にAの付加されたPCR産物全般】 |
TArget CloneTM -Plus- |
|

特長1:迅速・高効率
ライゲーション反応が最短5分で完了します。
特長2:確実
LacZを用いたカラーセレクションが可能です。
特長3:便利
マルチクローニングサイトの両端に転写用のプロモーター(T7、T3)を有しており、転写産物の調整に用いることができます。
特長4:平滑末端のPCR産物にも対応《TArget CloneTM -Plus-》
TAクローニングキットに『A-attachment Mix』を組み合わせてさらに利便性を向上させたKODシリーズ専用のTAクローニングキットです。平滑末端のPCR産物でも精製することなく、『A-attachment Mix』と混合し10分間反応させるだけでdA付加が完了します。TAクローニングすることが可能。
別売り開始いたしました! いままでキットの一部だった『A-attachment Mix』の別売りを開始いたしました。 価格等はコチラからご覧下さい。 |
| ※pTA2のベクター情報はこちらからご覧いただけます。 |

| 上記のPDFファイルはコチラ からダウンロードしていただけます。 |
実施例1.クローニング効率の比較(TArget CloneTM -Plus-の特長)
λDNA 2kbを
Taq DNA Polymeraseまたは
KOD DNA Polymeraseで増幅しました。そのPCR産物を直接Tベクターに挿入した場合とA-attachment Mixを添加した場合とでそれぞれのクローニングの効率が比較しました。
結果より、
Taq DNA PolymeraseのPCR産物を
TAクローニングした場合と、同等のクローニング効率が得られました。

実施例2. 様々なPCR産物を用いたTAクローニング効率の検討
高正確性酵素:KOD -Plus-、KOD -Plus- ver.2、及びBlend Taq® を用いて、human genomeよりβ-globin遺伝子0.5kbをPCR増幅しました。その後、PCRプロダクトを精製なしでTArget CloneTM、及びTArget CloneTM -Plus-を用いて、pTA2 VectorにTAクローニングを行いました。 その結果、KOD -Plus-、KOD -Plus- ver.2を用いた場合、TArget CloneTM -Plus-を用いることにより、格段にクローニング効率が向上することが分かりました。一方Blend Taq®ではTArget CloneTM -Plus-と比べると、若干効率は低下しますが、TArget CloneTMを用いても問題なく高効率にTAクローニングできることが分かりました。

<関連情報>
基本反応条件等はコチラからご覧いただけます。
<ワンポイントアドバイス>
●精製PCR産物を用いた場合のA-attachment Mixの使用法について
PCR後にエキストラバンドが生じている場合は、PCR産物を精製してから用います。精製後、A-attachment Mixに加え、dNTP、Mg、PCR Bufferを1×濃度になるように加えて反応してください。



(品名をクリックすることで取扱説明書をダウンロードいただけます)
| 品名及び内容 |
包装 |
保存温度 |
Code No. |
価格 |
TAクローニングキット TArget Clone TM 10μl pTA2 Vector(50ng/μl) 50μl 2×Ligation Buffer 10μl T4 DNA Ligase |
10回用 |
-20℃ |
TAK-101 |
¥12,000 |
KOD/KOD-Plus-用 TAクローニングキット TArget CloneTM-Plus- 10μl pTA2 Vector(50ng/μl) 50μl 2×Ligation Buffer 10μl T4 DNA Ligase 10μl 10×A-attachment Mix |
10回用 |
-20℃ |
TAK-201 |
¥16,000 |
| 10×A-attachment Mix |
25μl (25回用) |
-20℃ |
TAK-301 |
¥12,000 |

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