ReverTra Dash^®

 
ReverTra Ace^® とKOD Dash^® の特長を併せ持つ高性能RT−PCRキットの決定版！

高効率逆転写酵素『ReverTra Ace^® 』と高効率PCR酵素『KOD Dash』の両製品の特長を併せ持つ高感度かつ迅速、簡便なRT-PCRキットです。様々なRT-PCRに応用することができます。

特長1：少量の鋳型にも対応
本キットは、2酵素系2ステップのRT-PCRキットであり、RT-PCRキットに比べて増幅効率が向上しており、少量の鋳型からでも効率よく増幅できます。またRT反応を全量PCRに持ち込めるので、少量の発現でも確認できます。

特長2：迅速なRT-PCR
KOD Dashは、Taq DNA Polymeraseに比べて合成速度が速いため、RT-PCRにかかる時間を短縮できます。

特長3：簡便
本キットは、RT-PCRに必要な試薬を全て含んでいます。逆転写反応とPCRを同一サンプルチューブで行うことができ、操作が簡便です。 


実施例1：RT-PCRの効率の検討
HeLa Total RNAを鋳型として、β-actin(838bp)をターゲットとするRT-PCRにおいて、鋳型量を変化させた場合の増幅効率を、当社従来品および他社のRT-PCRキットと比較した。
MagExtracter^® -RNA-を用いて抽出したHeLa Total RNA 100pg〜1.0μgをOligo(dT)プライマーで42℃、20min.逆転写反応を行った後、99℃で5min.加熱して不活性を行った。RT反応液全量20μlを、100μlの系に持ち込みPCRを行った。
ReverTra Dashでは、弊社従来品および他社RT-PCRキットに比べて少量の鋳型RNAからのRT-PCRが可能であることが確認された。

ReverTra Dash^® キット内容

		PCR-401
パーツNo.		(100回用)
1	高効率逆転写酵素ReverTra Ace®	100μl
2	5×RT Buffer (25mM Mg含有)	400μl
3	RNase inihibitor (10U/μl)	100μl
4	dNTP Mixture (各10mM)	200μl
5	RNase Free H2O	1200μl
6	Oligo(dT)20 (10pmol/μl)	100μl
7	Random Primer (25pmol/μl)	100μl
8	Control Primer F (10pmol/μl)	50μl
9	Control Primer R (10pmol/μl)	50μl
10	Positive Control RNA (105 copies/μl) Human G3PDH RNA（転写poly(A)+RNA）	50μl
11	KOD Dash (2.5U/μl)	100μl
12	10×PCR Buffer	1000μl

「PCR実験関連情報」
●RT-PCRについて
●PCR Polymerase選択の指標
●DNA Polymeraseについて
●各PCR用Polymeraseの酵素的性質
●Exonuclease活性について　
●TdT(Terminal deoxynucleotidyl transferase)活性について
●ホットスタートについて
●Bufferによる性能の向上について
●PCRトラブルシューティング



1) Natsuka S. et al., J. Biochem. (Tokyo), 130: 731-735 (2001)